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酶聯免疫吸附實驗(elisa)

發布時間:2021/09/24
酶聯免疫吸附實驗(elisa)

  實驗介紹酶聯免疫吸附實驗(ELISA) 即將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行的技術。該技術可用于檢測大分子抗原和特異性抗體等,具有快速、靈敏、簡便、載體易于標準化等優點。

 

  它采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產生顏色反應,用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。

 

  測量時,抗原(抗體)先結合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結合成的偶聯物(標記物),此偶聯物仍保留其原免疫活性與酶活性,當偶聯物與固相載體上的抗原(抗體)反應結合后,再加上酶的相應底物,即起催化水解或氧化還原反應而呈顏色。其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成比例。 這種有色產物可用分光光度計(酶標儀)加以測定。其方法簡單,方便迅速,特異性強。

 

  在收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。建議新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請造模取材后,將標本及時分裝后放在70℃條件下保存,避免反復凍融。

 

  ELISA可以檢測分泌型蛋白、組織細胞裂解液(胞/核內蛋白)、組蛋白甲基化/磷酸化/乙?;瘷z測等。

 

  交付結果:實驗報告、結果的分析

 

  質量保證:客觀、公正、可信的實驗結果

 

  交付時間:大約10-15個工作日(根據預實驗、樣本數量情況決定)

 

  服務項目

 

  服務流程1、接收樣本以及ELISA試劑盒,實驗室可以有償提供常備試劑盒或者幫客戶代購。

 

  2、預實驗確定樣本中蛋白表達豐度以及試劑盒效果。

 

  3、正式實驗,5-10個工作日內完成,根據檢測指標數量多少相應變化。

 

  4、出具實驗報,數據分析。

 

  樣本要求可以接收樣本有:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上等;樣本來源為人和大小鼠。

 

  1、血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,2000-3000rpm離心20分鐘左右。仔細收集上清,提取后保存于-80℃或者液氮。

 

  2、血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后, 2000-3000rpm離心20分鐘左右,提取后保存于-80℃或者液氮。

 

  3、胸腹水、腦脊液、尿液:用無菌管收集。2000-3000rpm離心10分鐘左右。提取后保存于-80℃或者液氮。

 

  4、細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。2000-3000rpm離心10分鐘左右,提取后保存于-80℃或者液氮。

 

  5、培養細胞:每個實驗組細胞數量保證大于106以上,細胞狀態良好, 保證運輸到實驗室的細胞為活細胞。

 

  6、組織標本:組織重量要求大于100mg,保存于-80℃或者液氮。

 

  7、其他:特殊樣本根據具體情況安排實驗方案。

 

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