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凝膠遷移(EMSA)實驗

發布時間:2021/09/24
凝膠遷移(EMSA)實驗

  實驗介紹EMSA ( Electrophoretic Mobility Shift Assay ) 凝膠遷移實驗是一種研究DNA與蛋白質或RNA與蛋白質相互作用的常用技術。這項技術是基于DNA/蛋白質或RNA/蛋白質復合體在聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)中有不同遷移率的原理。當核轉錄因子與一條人工合成的特異的DNA或RNA結合后,其在PAGE中的遷移率將小于未結合核蛋白轉錄因子的DNA,從而檢測到活化的與DNA或RNA結合的蛋白轉錄或調節因子。EMSA研究順式作用元件與對應轉錄因子的相互作用這個層次,核心功能是驗證蛋白質與特定核酸序列的結合特性,從而間 接推斷已知蛋白質的靶序列或已知序列的結合蛋白分子。當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白或核蛋白提取物。在檢測RNA結合蛋白時,依據目的RNA結合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用細胞核或胞質提取物。競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特異)和其它非特異片段,來確定DNA或RNA結合蛋白的特異性。

 

  交付結果:完整實驗報告、實驗結果圖片

 

  質量保證:客觀、公正、可信的實驗結果

 

  交付時間:大約10-15個工作日(根據預實驗、樣本數量情況決定)

 

  服務項目

 

  服務流程1、接收樣本、已經合成3'末端被Biotin標記的探針、抗體。

 

  2、預實驗確定蛋白表達以及探針標記。

 

  3、正式實驗。

 

  4、5-10個工作日內完成,根據蛋白表達豐度不同以及檢測指標數量多少會相應變化。

 

  5、出具實驗報告,提供原始掃描圖片。

 

  樣本要求可以接收樣本有:提取蛋白樣本、細胞樣本。

 

  1、客戶提供已經提取樣本

 

  1)、蛋白保存完好:蛋白提取后保存于-80℃或者液氮。

 

  2)、提取過程中加入合適蛋白酶抑制劑。

 

  3)、蛋白采用BCA法測濃度后,濃度范圍應該為1-4ug/ul或者更高。

 

  4)、經預實驗檢測合格后才可進行正式實驗。

 

  2、客戶提供細胞樣本

 

  1)、細胞狀態良好, 保證運輸到實驗室的細胞為活細胞。

 

  2)、每個實驗組細胞數量保證大于107以上,根據檢測指標數量多少細胞要求數量會相應變化。

 

  3、客戶提供組織樣本

 

  1)、建議新鮮組織提取核蛋白。

 

  2)、組織保存完好:保存于-80℃或者液氮。

 

  3)、經過凍存組織提取核蛋白效果不理想。根據具體情況提供組織樣本實驗方案。

 

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